การทดสอบเอชไอวีของ Western Blot ทำงานอย่างไร

การทดสอบเอชไอวีมักเป็นกระบวนการหลายขั้นตอน การทดสอบครั้งแรกที่ใช้โดยทั่วไปคือการทดสอบความไวสูง การทดสอบความไวสูงได้รับการออกแบบมาเพื่อตรวจหาการติดเชื้อเอชไอวีที่อาจเกิดขึ้นได้มากที่สุด การทดสอบครั้งแรกนั้นตามด้วยการทดสอบที่เฉพาะเจาะจงอย่างน้อยหนึ่งรายการเพื่อแยกแยะการวินิจฉัย HIV ที่ผิดพลาดที่อาจเกิดขึ้นได้ ในอดีต การทดสอบที่ใช้บ่อยที่สุดในการทดสอบเพื่อยืนยันคือการทดสอบ Western blot อย่างไรก็ตาม มีการทดสอบยืนยันอื่น ๆ ที่เป็นที่ต้องการอยู่แล้ว Western blot ถูกลบออกจากศูนย์ควบคุมและป้องกันโรคที่แนะนำอัลกอริธึมการทดสอบ HIV ในห้องปฏิบัติการในปี 2014 เพื่อสนับสนุนการใช้การทดสอบแอนติบอดี/แอนติเจนรุ่นที่สี่เพื่อยืนยันการทดสอบคัดกรองเบื้องต้นในเชิงบวก

การทดสอบ Western Blot ทำงานอย่างไร

การทดสอบ Western blots เรียกอีกอย่างว่าโปรตีนอิมมูโนบล็อก การทดสอบเหล่านี้ใช้เพื่อตรวจหาโปรตีนจำเพาะในตัวอย่าง เทคนิคพื้นฐานของ Western blot เกี่ยวข้องกับการคัดแยกโปรตีนตามความยาวบนเจล จากนั้นจึงตรวจสอบกริดนั้นด้วยแอนติบอดีที่ทำปฏิกิริยากับโปรตีนเฉพาะที่กำลังค้นหา

อย่างไรก็ตาม เมื่อใช้ Western blots สำหรับการทดสอบ HIV กระบวนการนี้จะดำเนินการย้อนกลับ โดยปกติ ในการทดสอบ Western blot โปรตีนที่ไม่รู้จักจะถูกค้นหาด้วยแอนติบอดีที่รู้จัก อย่างไรก็ตาม สำหรับการทดสอบ HIV Western blot นักวิทยาศาสตร์จะทำงานกับตัวอย่างโปรตีน HIV ที่เตรียมไว้ และดูว่ามีแอนติบอดีในเลือดของบุคคลติดอยู่หรือไม่

การทดสอบ HIV แบบ Western blot มักจะมองหาแอนติบอดีต่อโปรตีน HIV ต่อไปนี้:

• โปรตีนจากซองจดหมายเอชไอวี: gp41 และ gp120/gp160
• โปรตีนจากแกนกลางของไวรัส: p17, p24, p55
• เอนไซม์ที่เอชไอวีใช้ในกระบวนการติดเชื้อ: p31, p51, p66

เพื่อให้บุคคลได้รับการพิจารณาว่าติดเชื้อ HIV พวกเขาจำเป็นต้องมีแอนติบอดีต่อโปรตีนซองจดหมายและโปรตีนหลักตัวใดตัวหนึ่งหรือกับเอนไซม์ตัวใดตัวหนึ่ง หากบุคคลมีแอนติบอดีที่ต่อต้านโปรตีนหลายชนิด ผลลัพธ์ของพวกเขามักจะไม่แน่ชัด อัลกอริธึมที่แน่นอนสำหรับการประกาศผลที่ไม่แน่นอนนั้นแตกต่างกันไปสำหรับการทดสอบ Western blot แต่ละรายการ อย่างไรก็ตาม เป้าหมายคือการลดความเสี่ยงของการทดสอบที่เป็นเท็จเสมอซึ่งทำให้ใครบางคนไม่พอใจโดยไม่มีเหตุผล

ผลการตรวจ Western blot ที่ไม่แน่นอนอาจเป็นสัญญาณของการติดเชื้อเอชไอวีรายใหม่ ผลการทดสอบเหล่านี้อาจเกิดขึ้นเมื่อบุคคลได้รับสัมผัสหรือติดไวรัส retrovirus อื่น ๆ เช่น HTLV โดยทั่วไป ถ้าผู้ที่มีการทดสอบ Western blot HIV ที่ไม่ทราบแน่ชัดมีผลบวกกับ HIV การทดสอบ Western blot ของพวกเขาจะกลายเป็นบวกอย่างชัดเจนหลังจากเวลาผ่านไปนานขึ้น

การทดสอบ Western blot ใช้เป็นการทดสอบเพื่อยืนยันมากกว่าการทดสอบเบื้องต้น เนื่องจากมีความไวน้อยกว่าการทดสอบ ELISA รอบแรกหรือการทดสอบการตรวจจับ RNA ซึ่งหมายความว่ามีโอกาสน้อยที่จะตรวจพบการติดเชื้อ อย่างไรก็ตาม การทดสอบ Western blot ยังมีโอกาสน้อยที่จะให้ผลการทดสอบที่เป็นเท็จเมื่อใช้เพื่อยืนยันการทดสอบในเชิงบวกเบื้องต้น

หากคุณได้รับแจ้งว่าคุณมีการทดสอบ Western Blot ที่ไม่แน่นอน

การได้รับแจ้งว่าการทดสอบ Western blot นั้นไม่ทราบแน่ชัดอาจสร้างความเครียดอย่างมากสำหรับผู้ที่อยู่ระหว่างการทดสอบเอชไอวี มีสาเหตุหลายประการที่ไม่เกี่ยวข้องกับการได้รับเชื้อเอชไอวีซึ่งอาจทำให้เกิดผลลัพธ์ดังกล่าวได้แล้วอย่างไรก็ตาม ผู้ที่มีรอยเปื้อนแบบตะวันตกไม่ทราบแน่ชัดมักจะแนะนำให้ทำการทดสอบซ้ำ ไม่ว่าจะในทันทีหรือหลังจากเวลาผ่านไประยะหนึ่ง

ทำการทดสอบซ้ำทันทีเพื่อดูว่ามีข้อบกพร่องในวิธีการทำงานของ Western blot หรือไม่ ในทางตรงกันข้าม การรอหนึ่งเดือนหรือมากกว่านั้นก่อนที่จะทำการทดสอบซ้ำจะทำให้ระบบภูมิคุ้มกันของบุคคลมีเวลาที่จะสร้างแอนติบอดีเพิ่มเติมเพื่อต่อต้านแอนติเจนของเอชไอวี หากพวกเขาติดเชื้อเอชไอวีจริงๆ

การทดสอบซ้ำมักจะแก้ไขการทดสอบ Western blot ที่ไม่แน่นอนให้เป็นผลบวกหรือลบอย่างชัดเจน อย่างไรก็ตาม หากการทดสอบซ้ำๆ ยังคงส่งสัญญาณที่สร้างความสับสน แพทย์อาจต้องเปลี่ยนไปใช้วิธีอื่นในการพิจารณาว่าคุณติดเชื้อเอชไอวีหรือไม่ ไม่มีการทดสอบเอชไอวีแบบใดแบบหนึ่งที่เหมาะสำหรับทุกสถานการณ์